Diferencia entre revisiones de «Tiempo de retención»

Revisión del 13:36 12 oct 2026

El tiempo de retención (t_R) es el tiempo que transcurre desde la inyección de la muestra hasta la aparición del máximo del pico de un componente en el detector.^[1]^[2]^[3] La IUPAC lo denomina tiempo de retención total y lo expresa también como el volumen de fase móvil que entra a la columna entre la inyección y la salida del máximo del pico.^[4] Para un sistema cromatográfico determinado, cada compuesto presenta un valor propio de t_R, razón por la cual esta magnitud permite una identificación tentativa por comparación con un compuesto conocido.^[5]

Idea general

Los componentes de una muestra avanzan por la columna solo mientras están disueltos en la fase móvil; cuando se encuentran en la fase estacionaria no se desplazan. Un compuesto que pasa la mayor parte del tiempo en la fase móvil sale primero, y uno que permanece más tiempo en la fase estacionaria sale después.^[6] La proporción de tiempo en cada fase depende de la composición de la fase móvil, de la composición de la fase estacionaria y de la temperatura de separación.^[7]

La señal del detector en función del tiempo, o del volumen de fase móvil eluido, constituye el cromatograma. Cada componente separado aparece como un pico y su tiempo de retención se lee desde el instante de la inyección hasta el máximo de ese pico.^[2]

Partes de un cromatograma. La línea gris discontinua marca la inyección; la flecha gris es el tiempo muerto (t₀), las azules son los tiempos de retención (t_R) de los compuestos A y B, y la naranja es el tiempo de retención ajustado del compuesto A (valores ilustrativos). Figura elaborada por el autor, a partir de Snyder y Kirkland (1979), pp. 21–24, e IUPAC (1993), pp. 841–842.

Tiempo muerto y tiempo ajustado

El tiempo de retención de un compuesto retenido tiene dos partes: el tiempo que pasa en la fase móvil, que es igual para todos los compuestos y recibe el nombre de tiempo muerto (t₀), y el tiempo adicional que permanece en la fase estacionaria (t_S).^[8]^[9]

t_{R}=t_{0}+t_{S}

La diferencia entre ambos tiempos se denomina tiempo de retención ajustado (t_aj), que en la literatura se representa también con t′_R:^[10]

t_{aj}=t_{R}-t_{0}

El tiempo muerto se designa también con los símbolos t_M y t_m; en esta página se usa t₀.^[4]^[11]

La IUPAC distingue además entre tiempo de retención total, corregido, ajustado y neto. En cromatografía de líquidos no se aplica la corrección por compresibilidad de la fase móvil, por lo que el total y el corregido son iguales, y también lo son el ajustado y el neto.^[12]

Cómo se mide

El tiempo de retención se obtiene en tres pasos:

Se toma como origen el instante de la inyección.
Se localiza el máximo del pico del componente en el cromatograma.
Se lee el tiempo transcurrido entre ambos puntos, por lo general en minutos.

El tiempo suele medirse hasta el ápice del pico, pero en los picos asimétricos debe medirse hasta su centro de gravedad.^[13] Cuando se quiere el ajustado, se resta además el tiempo muerto, y el valor de este depende del marcador con que se determine: el marcador elegido modifica el factor de retención calculado, por lo que conviene indicar cuál se empleó.^[14] Los marcadores y sus límites se explican en Tiempo muerto.

Expresión matemática

El tiempo de retención se relaciona con el factor de retención (k), que compara el tiempo que el compuesto permanece retenido con el que pasa en la fase móvil.^[10]^[15] En textos antiguos se le llama factor de capacidad (k′); la IUPAC indica que el apóstrofo no es necesario.^[16]^[17] A partir de su definición se despeja t_R paso a paso:

k={\frac {t_{R}-t_{0}}{t_{0}}}

k\,t_{0}=t_{R}-t_{0}

t_{R}=t_{0}+k\,t_{0}

t_{R}=t_{0}\,(1+k)

La ecuación muestra que t_R es igual a t₀ cuando k = 0, es decir, cuando el compuesto no se retiene, y que es mayor que t₀ cuando k > 0. El término k t₀ es el tiempo que el compuesto permanece en la fase estacionaria.

Ejemplo

Un compuesto tiene un tiempo muerto de 1.5 min y un factor de retención de 2.0 (valores ilustrativos). Su tiempo de retención es:

t_{R}=t_{0}\,(1+k)

t_{R}=1.5\ \mathrm {min} \times (1+2.0)

t_{R}=1.5\ \mathrm {min} \times 3.0

t_{R}=4.5\ \mathrm {min}

La tabla y la figura muestran cómo cambia t_R con el factor de retención cuando t₀ permanece en 1.5 min:

Factor de retención, k	Cálculo	Tiempo de retención, t_R
0	1.5 min × (1 + 0)	1.5 min
1	1.5 min × (1 + 1)	3.0 min
2	1.5 min × (1 + 2)	4.5 min
4	1.5 min × (1 + 4)	7.5 min

Composición del tiempo de retención para cuatro valores de k con t₀ = 1.5 min. La parte azul, igual en todos los casos, es el tiempo en la fase móvil; la naranja, k t₀, es el tiempo adicional en la fase estacionaria (valores ilustrativos). Figura elaborada por el autor, a partir de Harvey (2000), p. 551, y Skoog et al. (2008), pp. 766 y 768.

Efecto del flujo

El tiempo muerto varía de forma inversa con la velocidad de la fase móvil y, mientras no cambien la composición de la fase móvil ni la temperatura, el factor de retención del compuesto es el mismo.^[7]^[5] En consecuencia, si el flujo se multiplica por un factor x, el tiempo de retención se divide entre x.^[5]

Para el compuesto del ejemplo (t₀ = 1.5 min y k = 2.0 con un flujo de 1.0 mL/min), al duplicar el flujo a 2.0 mL/min el tiempo muerto se reduce a la mitad. El subíndice 2 indica los valores con el flujo mayor:

t_{0,2}={\frac {1.5\ \mathrm {min} }{2}}

t_{0,2}=0.75\ \mathrm {min}

t_{R,2}=0.75\ \mathrm {min} \times (1+2.0)

t_{R,2}=2.25\ \mathrm {min}

El volumen de retención (V_R) es el volumen de fase móvil que sale entre la inyección y el máximo del pico, y se obtiene como el producto del flujo volumétrico F por el tiempo de retención. Con cada flujo:^[18]^[3]

V_{R}=F\,t_{R}

V_{R}=1.0\ \mathrm {mL/min} \times 4.5\ \mathrm {min} =4.5\ \mathrm {mL}

V_{R,2}=2.0\ \mathrm {mL/min} \times 2.25\ \mathrm {min} =4.5\ \mathrm {mL}

Magnitud	Flujo de 1.0 mL/min	Flujo de 2.0 mL/min	Cambio
Tiempo muerto, t₀	1.5 min	0.75 min	Se reduce a la mitad
Tiempo de retención, t_R	4.5 min	2.25 min	Se reduce a la mitad
Volumen de retención, V_R	4.5 mL	4.5 mL	No cambia

Efecto de duplicar el flujo sobre un compuesto con k = 2.0. Arriba, los picos aparecen antes con el flujo mayor; abajo, el tiempo de retención se reduce a la mitad y el volumen de retención permanece igual (valores ilustrativos). Figura elaborada por el autor, a partir de Snyder y Kirkland (1979), pp. 24–25.

Por esta razón, dos corridas del mismo método con flujos distintos producen tiempos de retención distintos, mientras que el volumen de retención ofrece un valor independiente del flujo que entrega la bomba.^[18]^[2]

Retención y anchura de los picos

En elución isocrática, es decir, con composición constante de la fase móvil, la anchura de los picos aumenta con el tiempo de retención: los componentes que eluyen tarde producen picos más anchos.^[19] Véase Elución isocrática y en gradiente.

Tres componentes en elución isocrática. Al aumentar el tiempo de retención, el pico se ensancha y su altura disminuye (esquema cualitativo, con la misma cantidad de cada componente). Figura elaborada por el autor, a partir de Agilent (2016), p. 56.

En los métodos con gradiente, el volumen de retardo no afecta la retención en los isocráticos, pero sí la modifica de forma importante en los de gradiente; si un método con gradiente se traslada de un instrumento a otro y los tiempos de retención cambian, conviene comparar los volúmenes de retardo de ambos sistemas.^[20]

Para qué se usa

Identificación tentativa

La coincidencia del tiempo de retención de una señal desconocida con el de un compuesto conocido, en el mismo sistema, es un indicio de que se trata del mismo compuesto, pero no lo demuestra: puede ocurrir que ningún compuesto conocido coincida o que más de uno presente un tiempo de retención similar. La identificación positiva requiere aislar la señal y caracterizarla con otras técnicas.^[21] Véase Análisis cualitativo y cuantitativo en HPLC.

Identificación tentativa por tiempo de retención. Una señal de la muestra que coincide con el patrón (azul) es un indicio de identidad, pero un compuesto distinto (naranja) puede presentar el mismo tiempo de retención en el mismo sistema (esquema cualitativo). Figura elaborada por el autor, a partir de Snyder y Kirkland (1979), pp. 43–44.

Picos traslapados

Cuando dos picos están poco resueltos, el máximo aparente de cada uno se desplaza hacia el pico vecino y el tiempo de retención medido contiene un error.^[21] Véase Resolución cromatográfica.

Dos picos traslapados. El máximo de la señal registrada (negro) no coincide con el máximo real de ninguno de los dos componentes y queda desplazado hacia el pico vecino (esquema calculado con dos picos gaussianos). Figura elaborada por el autor, a partir de Snyder y Kirkland (1979), pp. 43–44.

Sobrecarga de la columna

Si la cantidad inyectada supera la capacidad lineal de la columna, los factores de retención dejan de ser constantes y los tiempos de retención ya no sirven para el análisis cualitativo por comparación con patrones.^[22]

Aptitud del sistema

Los tiempos de retención y las retenciones relativas que aparecen en las monografías de la USP se indican con fines informativos, salvo que la monografía establezca otra cosa, y a las retenciones relativas no se les aplican criterios de aceptación.^[23] En la industria farmacéutica, el factor de retención se emplea como indicador de aptitud del sistema porque cambia cuando la columna envejece y pierde fase enlazada.^[14] Véase Aptitud del sistema.

Cuestionario de autoevaluación

1. ¿Desde qué instante y hasta qué punto del pico se mide el tiempo de retención, y qué es el tiempo de retención ajustado?

Se mide desde el instante de la inyección hasta el máximo del pico del componente en el cromatograma. El tiempo de retención ajustado es la diferencia entre el tiempo de retención y el tiempo muerto, y corresponde al tiempo que el compuesto permanece en la fase estacionaria.

2. Un compuesto sale a los 7.0 min y el tiempo muerto del sistema es de 2.0 min. ¿Cuál es su factor de retención?

Se aplica la definición del factor de retención:

k={\frac {t_{R}-t_{0}}{t_{0}}}

k={\frac {7.0\ \mathrm {min} -2.0\ \mathrm {min} }{2.0\ \mathrm {min} }}

k={\frac {5.0\ \mathrm {min} }{2.0\ \mathrm {min} }}

k=2.5

3. Un compuesto tiene un tiempo de retención de 6.0 min con un flujo de 0.8 mL/min. Si el flujo se duplica a 1.6 mL/min, ¿cuáles son su nuevo tiempo de retención y su volumen de retención?

Con el flujo duplicado, el tiempo de retención se reduce a la mitad:

t_{R,2}={\frac {6.0\ \mathrm {min} }{2}}=3.0\ \mathrm {min}

El volumen de retención es el producto del flujo por el tiempo de retención y no cambia:

Error al representar (MathML con SVG o PNG como alternativa (recomendado para navegadores modernos y herramientas de accesibilidad): respuesta no válida («Math extension cannot connect to Restbase.») del servidor «https://wikimedia.org/api/rest_v1/»:): {\displaystyle V_R = 0.8 \ \mathrm{mL/min} \times 6.0 \ \mathrm{min} = 4.8 \ \mathrm{mL}}

V_{R,2}=1.6\ \mathrm {mL/min} \times 3.0\ \mathrm {min} =4.8\ \mathrm {mL}

Véase también

Ficha de documentación

Fecha: 12 de octubre de 2026.
Autor: Daniel Morales Gutiérrez.
Elaboración: Daniel Morales Gutiérrez, con asistencia de Claude Pro Investigación (Anthropic). Véase Metodología de elaboración de la WiQui HPLC.

Referencias

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[Snyder1979_p18-7] 7,0 ^7,1 Snyder, L. R.; Kirkland, J. J. Introduction to Modern Liquid Chromatography. 2.ª ed. Nueva York: Wiley-Interscience, 1979, cap. 2, p. 18.

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[Agilent2016_p56-19] Agilent Technologies. The LC Handbook: Guide to LC Columns and Method Development. Publicación 5990-7595EN, 2016, p. 56.

[Agilent2016_p58-20] Agilent Technologies. The LC Handbook: Guide to LC Columns and Method Development. Publicación 5990-7595EN, 2016, p. 58.

[Snyder1979_p43_44-21] 21,0 ^21,1 Snyder, L. R.; Kirkland, J. J. Introduction to Modern Liquid Chromatography. 2.ª ed. Nueva York: Wiley-Interscience, 1979, cap. 2, pp. 43–44.

[Snyder1979_p27-22] Snyder, L. R.; Kirkland, J. J. Introduction to Modern Liquid Chromatography. 2.ª ed. Nueva York: Wiley-Interscience, 1979, cap. 2, p. 27.

[USP621_p16-23] United States Pharmacopeial Convention. 〈621〉 Chromatography. Texto armonizado (etapa 4), oficial desde el 1 de diciembre de 2022. USP–NF, sección sobre aptitud del sistema, p. 16 del PDF de armonización.

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Diferencia entre revisiones de «Tiempo de retención»

Revisión del 13:36 12 oct 2026

Sumario

Idea general

Tiempo muerto y tiempo ajustado

Cómo se mide

Expresión matemática

Ejemplo

Efecto del flujo

Retención y anchura de los picos

Para qué se usa

Identificación tentativa

Picos traslapados

Sobrecarga de la columna

Aptitud del sistema

Cuestionario de autoevaluación

Véase también

Ficha de documentación

Referencias

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@@ Línea 1: / Línea 1: @@
-<!-- Página de ejemplo "Tiempo de retención" (tipo A: concepto). Versión 3 del borrador, 9 de octubre de 2026: incorpora IUPAC (1993), Rimmer et al. (2002), Agilent (2016) y la página de USP 〈621〉. -->
+<!-- Página "Tiempo de retención" (tipo A: concepto). Versión 4, 12 de octubre de 2026. Plan v3, página 11, Etapa 3. Reescrita en el formato didáctico aprobado con «Tiempo muerto» (seis figuras, ecuaciones una por renglón, ejemplos resueltos); las fuentes se indican solo en las referencias. -->
-<!-- Fuentes leídas para este borrador: Snyder y Kirkland (1979), cap. 2, pp. 17–18, 21, 23–25, 27, 43–44; Harvey (2000), cap. 12, pp. 548, 549, 551; IUPAC (1993), pp. 819–821 y 841–843; Rimmer et al. (2002), pp. 219–225; Agilent (2016), pp. 56, 58, 146, 161 y 162; USP 〈621〉, sección "Definitions" (p. 12 del PDF de armonización). -->
+<!-- Fuentes leídas: Snyder y Kirkland (1979), cap. 2, pp. 17–18, 23–25, 27, 43–44; Harvey (2000), cap. 12, pp. 548, 549, 551; Skoog, Holler y Crouch (2008, 6.ª ed. en español), cap. 26, pp. 766 y 768; Meyer (2010), cap. 2, p. 24; IUPAC (1993), pp. 841–843; USP 〈621〉, pp. 12 y 16 del PDF; Rimmer et al. (2002), pp. 219–224; Agilent (2016), pp. 56, 58, 146 y 162. -->
-<!-- NO CITADAS: Snyder, Kirkland y Dolan (2010): el archivo cargado contiene solo portada, créditos e índice (30 páginas), sin el texto de los capítulos. Dolan (2011): no se cargó. -->
+<!-- Imágenes por subir (nombre exacto): WiQui_HPLC_tiempo_de_retencion_partes.png, _factor_k.png, _flujo.png, _anchura.png, _identificacion.png, _traslape.png (todas con el prefijo WiQui_HPLC_tiempo_de_retencion). La imagen anterior WiQui_HPLC_tiempo_de_retencion_cromatograma.png ya no se usa en esta versión. -->
-<!-- PENDIENTE: unificar el símbolo del tiempo muerto en toda la wiki (t0 en Snyder; tM en IUPAC y USP; tm en Harvey). Esta página usa t0 y menciona tM. -->
+<!-- PENDIENTE: unificar el símbolo del tiempo muerto en toda la wiki (t0 en Snyder; tM en IUPAC y USP; tm en Harvey). Esta página usa t0 y lo señala. -->
 El '''tiempo de retención''' (''t''<sub>R</sub>) es el tiempo que transcurre desde la inyección de la muestra hasta la aparición del máximo del pico de un componente en el detector.<ref name="Snyder1979_p21">Snyder, L. R.; Kirkland, J. J. ''Introduction to Modern Liquid Chromatography''. 2.ª ed. Nueva York: Wiley-Interscience, 1979, cap. 2, p. 21.</ref><ref name="Harvey2000_p548">Harvey, D. ''Modern Analytical Chemistry''. Boston: McGraw-Hill, 2000, cap. 12, p. 548.</ref><ref name="USP621_p12">United States Pharmacopeial Convention. 〈621〉 ''Chromatography''. Texto armonizado (etapa 4), oficial desde el 1 de diciembre de 2022. USP–NF, sección «Definitions», p. 12 del PDF de armonización.</ref> La IUPAC lo denomina tiempo de retención total y lo expresa también como el volumen de fase móvil que entra a la columna entre la inyección y la salida del máximo del pico.<ref name="IUPAC1993_p841">Ettre, L. S. Nomenclature for chromatography (IUPAC Recommendations 1993). ''Pure Appl. Chem.'' 1993, 65 (4), 819–872, p. 841.</ref> Para un sistema cromatográfico determinado, cada compuesto presenta un valor propio de ''t''<sub>R</sub>, razón por la cual esta magnitud permite una identificación tentativa por comparación con un compuesto conocido.<ref name="Snyder1979_p24">Snyder, L. R.; Kirkland, J. J. ''Introduction to Modern Liquid Chromatography''. 2.ª ed. Nueva York: Wiley-Interscience, 1979, cap. 2, p. 24.</ref>
-== Origen del tiempo de retención ==
+== Idea general ==
-Los componentes de una muestra avanzan por la columna a velocidades distintas porque se distribuyen de manera diferente entre la [[fase estacionaria]] y la [[fase móvil]]. Mientras una molécula permanece en la fase estacionaria no se desplaza; solo avanza cuando se encuentra en la fase móvil. Un compuesto que pasa la mayor parte del tiempo en la fase móvil sale primero y uno que permanece más tiempo en la fase estacionaria sale después.<ref name="Snyder1979_p17_18">Snyder, L. R.; Kirkland, J. J. ''Introduction to Modern Liquid Chromatography''. 2.ª ed. Nueva York: Wiley-Interscience, 1979, cap. 2, pp. 17–18.</ref> Esa distribución depende de la composición de la fase móvil, de la composición de la fase estacionaria y de la temperatura de separación.<ref name="Snyder1979_p18">Snyder, L. R.; Kirkland, J. J. ''Introduction to Modern Liquid Chromatography''. 2.ª ed. Nueva York: Wiley-Interscience, 1979, cap. 2, p. 18.</ref>
+Los componentes de una muestra avanzan por la columna solo mientras están disueltos en la [[fase móvil]]; cuando se encuentran en la [[fase estacionaria]] no se desplazan. Un compuesto que pasa la mayor parte del tiempo en la fase móvil sale primero, y uno que permanece más tiempo en la fase estacionaria sale después.<ref name="Snyder1979_p17_18">Snyder, L. R.; Kirkland, J. J. ''Introduction to Modern Liquid Chromatography''. 2.ª ed. Nueva York: Wiley-Interscience, 1979, cap. 2, pp. 17–18.</ref> La proporción de tiempo en cada fase depende de la composición de la fase móvil, de la composición de la fase estacionaria y de la temperatura de separación.<ref name="Snyder1979_p18">Snyder, L. R.; Kirkland, J. J. ''Introduction to Modern Liquid Chromatography''. 2.ª ed. Nueva York: Wiley-Interscience, 1979, cap. 2, p. 18.</ref>
-La señal del detector en función del tiempo o del volumen de fase móvil eluido constituye el [[cromatograma]], en el cual cada componente separado aparece como un pico. El tiempo de retención se mide desde el instante de la inyección hasta el máximo de ese pico.<ref name="Harvey2000_p548" /> Según el glosario de Agilent, el tiempo de retención suele medirse hasta el ápice del pico, pero en los picos asimétricos debe medirse hasta su centro de gravedad.<ref name="Agilent2016_p162">Agilent Technologies. ''The LC Handbook: Guide to LC Columns and Method Development''. Publicación 5990-7595EN, 2016, p. 162.</ref>
+La señal del detector en función del tiempo, o del volumen de fase móvil eluido, constituye el [[cromatograma]]. Cada componente separado aparece como un pico y su tiempo de retención se lee desde el instante de la inyección hasta el máximo de ese pico.<ref name="Harvey2000_p548" />
+[[Archivo:WiQui_HPLC_tiempo_de_retencion_partes.png|thumb|center|600px|Partes de un cromatograma. La línea gris discontinua marca la inyección; la flecha gris es el tiempo muerto (''t''<sub>0</sub>), las azules son los tiempos de retención (''t''<sub>R</sub>) de los compuestos A y B, y la naranja es el tiempo de retención ajustado del compuesto A (valores ilustrativos). Figura elaborada por el autor, a partir de Snyder y Kirkland (1979), pp. 21–24, e IUPAC (1993), pp. 841–842.]]
+=== Tiempo muerto y tiempo ajustado ===
+El tiempo de retención de un compuesto retenido tiene dos partes: el tiempo que pasa en la fase móvil, que es igual para todos los compuestos y recibe el nombre de [[tiempo muerto]] (''t''<sub>0</sub>), y el tiempo adicional que permanece en la fase estacionaria (''t''<sub>S</sub>).<ref name="Meyer2010_p24">Meyer, V. R. ''Practical High-Performance Liquid Chromatography''. 5.ª ed. Chichester: Wiley, 2010, cap. 2, p. 24.</ref><ref name="Skoog2008_p766">Skoog, D. A.; Holler, F. J.; Crouch, S. R. ''Principios de análisis instrumental''. 6.ª ed. México: Cengage Learning, 2008, cap. 26, p. 766.</ref>
+:<math>t_R = t_0 + t_S</math>
+La diferencia entre ambos tiempos se denomina tiempo de retención ajustado (''t''<sub>aj</sub>), que en la literatura se representa también con ''t''′<sub>R</sub>:<ref name="Harvey2000_p551">Harvey, D. ''Modern Analytical Chemistry''. Boston: McGraw-Hill, 2000, cap. 12, p. 551.</ref>
+:<math>t_{aj} = t_R - t_0</math>
+El tiempo muerto se designa también con los símbolos ''t''<sub>M</sub> y ''t''<sub>m</sub>; en esta página se usa ''t''<sub>0</sub>.<ref name="IUPAC1993_p841" /><ref name="Harvey2000_p549">Harvey, D. ''Modern Analytical Chemistry''. Boston: McGraw-Hill, 2000, cap. 12, p. 549.</ref>
+La IUPAC distingue además entre tiempo de retención total, corregido, ajustado y neto. En cromatografía de líquidos no se aplica la corrección por compresibilidad de la fase móvil, por lo que el total y el corregido son iguales, y también lo son el ajustado y el neto.<ref name="IUPAC1993_p842">Ettre, L. S. Nomenclature for chromatography (IUPAC Recommendations 1993). ''Pure Appl. Chem.'' 1993, 65 (4), 819–872, p. 842.</ref>
+== Cómo se mide ==
+El tiempo de retención se obtiene en tres pasos:
+# Se toma como origen el instante de la inyección.
+# Se localiza el máximo del pico del componente en el cromatograma.
+# Se lee el tiempo transcurrido entre ambos puntos, por lo general en minutos.
+El tiempo suele medirse hasta el ápice del pico, pero en los picos asimétricos debe medirse hasta su centro de gravedad.<ref name="Agilent2016_p162">Agilent Technologies. ''The LC Handbook: Guide to LC Columns and Method Development''. Publicación 5990-7595EN, 2016, p. 162.</ref> Cuando se quiere el ajustado, se resta además el tiempo muerto, y el valor de este depende del marcador con que se determine: el marcador elegido modifica el factor de retención calculado, por lo que conviene indicar cuál se empleó.<ref name="Rimmer2002_p219_220">Rimmer, C. A.; Simmons, C. R.; Dorsey, J. G. The measurement and meaning of void volumes in reversed-phase liquid chromatography. ''J. Chromatogr. A'' 2002, 965, 219–232, pp. 219–220.</ref> Los marcadores y sus límites se explican en [[Tiempo muerto]].
 == Expresión matemática ==
-El tiempo de retención se relaciona con el tiempo muerto y con el factor de retención mediante la ecuación
+El tiempo de retención se relaciona con el [[factor de retención]] (''k''), que compara el tiempo que el compuesto permanece retenido con el que pasa en la fase móvil.<ref name="Harvey2000_p551" /><ref name="Skoog2008_p768">Skoog, D. A.; Holler, F. J.; Crouch, S. R. ''Principios de análisis instrumental''. 6.ª ed. México: Cengage Learning, 2008, cap. 26, p. 768.</ref> En textos antiguos se le llama factor de capacidad (''k′''); la IUPAC indica que el apóstrofo no es necesario.<ref name="Snyder1979_p23_24">Snyder, L. R.; Kirkland, J. J. ''Introduction to Modern Liquid Chromatography''. 2.ª ed. Nueva York: Wiley-Interscience, 1979, cap. 2, pp. 23–24.</ref><ref name="IUPAC1993_p843">Ettre, L. S. Nomenclature for chromatography (IUPAC Recommendations 1993). ''Pure Appl. Chem.'' 1993, 65 (4), 819–872, p. 843.</ref> A partir de su definición se despeja ''t''<sub>R</sub> paso a paso:
+:<math>k = \frac{t_R - t_0}{t_0}</math>
+:<math>k \, t_0 = t_R - t_0</math>
+:<math>t_R = t_0 + k \, t_0</math>
+:<math>t_R = t_0 \, (1 + k)</math>
+La ecuación muestra que ''t''<sub>R</sub> es igual a ''t''<sub>0</sub> cuando ''k'' = 0, es decir, cuando el compuesto no se retiene, y que es mayor que ''t''<sub>0</sub> cuando ''k'' > 0. El término ''k'' ''t''<sub>0</sub> es el tiempo que el compuesto permanece en la fase estacionaria.
+=== Ejemplo ===
+Un compuesto tiene un tiempo muerto de 1.5 min y un factor de retención de 2.0 (valores ilustrativos). Su tiempo de retención es:
+:<math>t_R = t_0 \, (1 + k)</math>
+:<math>t_R = 1.5 \ \mathrm{min} \times (1 + 2.0)</math>
+:<math>t_R = 1.5 \ \mathrm{min} \times 3.0</math>
+:<math>t_R = 4.5 \ \mathrm{min}</math>
+La tabla y la figura muestran cómo cambia ''t''<sub>R</sub> con el factor de retención cuando ''t''<sub>0</sub> permanece en 1.5 min:
+{| class="wikitable"
+! Factor de retención, ''k'' !! Cálculo !! Tiempo de retención, ''t''<sub>R</sub>
+|-
+| 0 || 1.5 min × (1 + 0) || 1.5 min
+|-
+| 1 || 1.5 min × (1 + 1) || 3.0 min
+|-
+| 2 || 1.5 min × (1 + 2) || 4.5 min
+|-
+| 4 || 1.5 min × (1 + 4) || 7.5 min
+|}
+[[Archivo:WiQui_HPLC_tiempo_de_retencion_factor_k.png|thumb|center|600px|Composición del tiempo de retención para cuatro valores de ''k'' con ''t''<sub>0</sub> = 1.5 min. La parte azul, igual en todos los casos, es el tiempo en la fase móvil; la naranja, ''k'' ''t''<sub>0</sub>, es el tiempo adicional en la fase estacionaria (valores ilustrativos). Figura elaborada por el autor, a partir de Harvey (2000), p. 551, y Skoog et al. (2008), pp. 766 y 768.]]
+== Efecto del flujo ==
+El tiempo muerto varía de forma inversa con la velocidad de la fase móvil y, mientras no cambien la composición de la fase móvil ni la temperatura, el factor de retención del compuesto es el mismo.<ref name="Snyder1979_p18" /><ref name="Snyder1979_p24" /> En consecuencia, si el flujo se multiplica por un factor ''x'', el tiempo de retención se divide entre ''x''.<ref name="Snyder1979_p24" />
+Para el compuesto del ejemplo (''t''<sub>0</sub> = 1.5 min y ''k'' = 2.0 con un flujo de 1.0 mL/min), al duplicar el flujo a 2.0 mL/min el tiempo muerto se reduce a la mitad. El subíndice 2 indica los valores con el flujo mayor:
+:<math>t_{0,2} = \frac{1.5 \ \mathrm{min}}{2}</math>
+:<math>t_{0,2} = 0.75 \ \mathrm{min}</math>
+:<math>t_{R,2} = 0.75 \ \mathrm{min} \times (1 + 2.0)</math>
+:<math>t_{R,2} = 2.25 \ \mathrm{min}</math>
+El [[Tiempo muerto#Volumen de retención|volumen de retención]] (''V''<sub>R</sub>) es el volumen de fase móvil que sale entre la inyección y el máximo del pico, y se obtiene como el producto del flujo volumétrico ''F'' por el tiempo de retención. Con cada flujo:<ref name="Snyder1979_p25">Snyder, L. R.; Kirkland, J. J. ''Introduction to Modern Liquid Chromatography''. 2.ª ed. Nueva York: Wiley-Interscience, 1979, cap. 2, p. 25.</ref><ref name="USP621_p12" />
+:<math>V_R = F \, t_R</math>
+:<math>V_R = 1.0 \ \mathrm{mL/min} \times 4.5 \ \mathrm{min} = 4.5 \ \mathrm{mL}</math>
+:<math>V_{R,2} = 2.0 \ \mathrm{mL/min} \times 2.25 \ \mathrm{min} = 4.5 \ \mathrm{mL}</math>
-<math>t_R = t_0 \, (1 + k)</math>
+{| class="wikitable"
+! Magnitud !! Flujo de 1.0 mL/min !! Flujo de 2.0 mL/min !! Cambio
+|-
+| Tiempo muerto, ''t''<sub>0</sub> || 1.5 min || 0.75 min || Se reduce a la mitad
+|-
+| Tiempo de retención, ''t''<sub>R</sub> || 4.5 min || 2.25 min || Se reduce a la mitad
+|-
+| Volumen de retención, ''V''<sub>R</sub> || 4.5 mL || 4.5 mL || No cambia
+|}
-donde:
+[[Archivo:WiQui_HPLC_tiempo_de_retencion_flujo.png|thumb|center|600px|Efecto de duplicar el flujo sobre un compuesto con ''k'' = 2.0. Arriba, los picos aparecen antes con el flujo mayor; abajo, el tiempo de retención se reduce a la mitad y el volumen de retención permanece igual (valores ilustrativos). Figura elaborada por el autor, a partir de Snyder y Kirkland (1979), pp. 24–25.]]
-* ''t''<sub>R</sub> es el tiempo de retención del componente;
-* ''t''<sub>0</sub> es el [[tiempo muerto]], es decir, el tiempo que tardan en llegar al detector los solutos que no interactúan con la fase estacionaria y se desplazan a la misma velocidad que la fase móvil;<ref name="Harvey2000_p549">Harvey, D. ''Modern Analytical Chemistry''. Boston: McGraw-Hill, 2000, cap. 12, p. 549.</ref> la IUPAC y la USP lo denominan tiempo de retención de un compuesto no retenido (''hold-up time'') y lo representan con ''t''<sub>M</sub>;<ref name="IUPAC1993_p841" /><ref name="USP621_p12" />
-* ''k'' es el [[factor de retención]], cociente entre la cantidad de soluto en la fase estacionaria y la cantidad en la fase móvil. En textos antiguos se denomina factor de capacidad (''k′''); la IUPAC indica que el apóstrofo no es necesario y que sus nomenclaturas siempre han usado ''k''.<ref name="Snyder1979_p23_24">Snyder, L. R.; Kirkland, J. J. ''Introduction to Modern Liquid Chromatography''. 2.ª ed. Nueva York: Wiley-Interscience, 1979, cap. 2, pp. 23–24.</ref><ref name="IUPAC1993_p843">Ettre, L. S. Nomenclature for chromatography (IUPAC Recommendations 1993). ''Pure Appl. Chem.'' 1993, 65 (4), 819–872, p. 843.</ref><ref name="USP621_p12" />
-Reordenando la ecuación se obtiene <math>k = (t_R - t_0)/t_0</math>; la diferencia ''t''<sub>R</sub> − ''t''<sub>0</sub> recibe el nombre de tiempo de retención ajustado.<ref name="Harvey2000_p551">Harvey, D. ''Modern Analytical Chemistry''. Boston: McGraw-Hill, 2000, cap. 12, p. 551.</ref> La IUPAC establece que en cromatografía de líquidos no se aplica la corrección por compresibilidad de la fase móvil, por lo que los tiempos de retención total y corregido son iguales, y también lo son el ajustado y el neto.<ref name="IUPAC1993_p842">Ettre, L. S. Nomenclature for chromatography (IUPAC Recommendations 1993). ''Pure Appl. Chem.'' 1993, 65 (4), 819–872, p. 842.</ref> La ecuación muestra que ''t''<sub>R</sub> es igual a ''t''<sub>0</sub> cuando ''k'' = 0, es decir, cuando el compuesto no se retiene, y que es mayor que ''t''<sub>0</sub> cuando ''k'' > 0. Además, como ''t''<sub>0</sub> varía de forma inversa con la velocidad de la fase móvil, ''t''<sub>R</sub> también disminuye cuando aumenta el flujo.<ref name="Snyder1979_p24" /> Si el flujo se modifica en un factor ''x'', el tiempo muerto cambia en el factor 1/''x''.<ref name="Snyder1979_p24" />
+Por esta razón, dos corridas del mismo método con flujos distintos producen tiempos de retención distintos, mientras que el volumen de retención ofrece un valor independiente del flujo que entrega la bomba.<ref name="Snyder1979_p25" /><ref name="Harvey2000_p548" />
-<!-- ====================================================================== -->
+== Retención y anchura de los picos ==
-<!-- RECURSO VISUAL: insertar aquí (después de la explicación de la         -->
+En elución isocrática, es decir, con composición constante de la fase móvil, la anchura de los picos aumenta con el tiempo de retención: los componentes que eluyen tarde producen picos más anchos.<ref name="Agilent2016_p56">Agilent Technologies. ''The LC Handbook: Guide to LC Columns and Method Development''. Publicación 5990-7595EN, 2016, p. 56.</ref> Véase [[Elución isocrática]] y [[Elución en gradiente|en gradiente]].
-<!-- ecuación y antes de "El tiempo muerto y su medición").                 -->
-<!-- PROMPT PARA LA IA GENERADORA DE IMÁGENES, versión sin texto            -->
-<!-- (copiar completo):                                                   -->
-<!-- Crea un diagrama científico didáctico en estilo vectorial plano, fondo -->
-<!-- blanco puro, formato horizontal 16:9, sin sombras, sin degradados y    -->
-<!-- sin efectos 3D. La imagen NO debe contener texto, letras, números,     -->
-<!-- símbolos, marcas de escala ni leyendas de ningún tipo.                  -->
-<!-- Dibuja dos ejes negros finos en forma de L: el eje horizontal ocupa    -->
-<!-- el 90 % del ancho, cerca del borde inferior, y el eje vertical sube    -->
-<!-- desde su extremo izquierdo hasta el 85 % de la altura. Sobre el eje    -->
-<!-- horizontal, una línea base negra fina, recta y plana, recorre todo el  -->
-<!-- ancho. A partir de esa línea base se elevan exactamente tres picos     -->
-<!-- gaussianos simétricos, sin ruido y sin solaparse:                      -->
-<!-- Pico 1: estrecho y bajo (25 % de la altura del eje vertical), con su   -->
-<!-- máximo al 15 % del ancho del eje horizontal.                           -->
-<!-- Pico 2: altura mayor (70 % de la altura del eje), un poco más ancho    -->
-<!-- que el pico 1, con su máximo al 45 % del ancho.                        -->
-<!-- Pico 3: algo más bajo que el pico 2 (55 % de la altura) y más ancho    -->
-<!-- que el pico 2, con su máximo al 75 % del ancho.                        -->
-<!-- En el origen del eje horizontal (0 %) traza una línea vertical gris    -->
-<!-- (#7F7F7F) discontinua, desde el eje hasta el 85 % de la altura: marca  -->
-<!-- el instante de la inyección. Desde el máximo de cada pico baja una     -->
-<!-- línea vertical punteada gris hasta el eje horizontal.                  -->
-<!-- Debajo del eje horizontal dibuja tres flechas horizontales de doble    -->
-<!-- punta, en tres niveles separados, todas desde la línea de inyección:   -->
-<!-- la más alta, en gris (#7F7F7F), termina bajo el máximo del pico 1;     -->
-<!-- la intermedia, en azul (#0072B2), termina bajo el máximo del pico 2;   -->
-<!-- la más baja, en naranja (#E69F00), termina bajo el máximo del pico 3.  -->
-<!-- Los picos se dibujan con línea negra y relleno muy claro del mismo     -->
-<!-- color que su flecha (gris claro, azul claro y naranja claro).          -->
-<!-- No incluyas logotipos, marcas, equipos, personas, cuadrícula ni        -->
-<!-- elementos decorativos, y no reproduzcas figuras de libros. Si algún    -->
-<!-- elemento no puede representarse exactamente como se describe,         -->
-<!-- omítelo en lugar de inventarlo.                                        -->
-<!-- VERIFICAR ANTES DE SUBIR: tres picos simétricos en 15 %, 45 % y 75 %   -->
-<!-- del ancho; línea de inyección en el origen; tres flechas que inician   -->
-<!-- en la inyección y terminan bajo cada máximo, con los colores           -->
-<!-- indicados; ningún texto ni número. Las posiciones cumplen              -->
-<!-- k = (tR − t0)/t0: pico 2, k = 2; pico 3, k = 4.                       -->
-<!-- ====================================================================== -->
-<!-- Nombre de archivo para subir: WiQui_HPLC_tiempo_de_retencion_cromatograma.png -->
-[[Archivo:WiQui_HPLC_tiempo_de_retencion_cromatograma.png|thumb|center|600px|Cromatograma esquemático. La línea gris discontinua marca la inyección; la flecha gris señala el tiempo muerto (''t''<sub>0</sub>) y las flechas azul y naranja, los tiempos de retención (''t''<sub>R</sub>) de dos compuestos retenidos. Diseño propio basado en Snyder y Kirkland (1979), cap. 2, pp. 21–24, e IUPAC (1993), p. 841.]]
-== El tiempo muerto y su medición ==
+[[Archivo:WiQui_HPLC_tiempo_de_retencion_anchura.png|thumb|center|600px|Tres componentes en elución isocrática. Al aumentar el tiempo de retención, el pico se ensancha y su altura disminuye (esquema cualitativo, con la misma cantidad de cada componente). Figura elaborada por el autor, a partir de Agilent (2016), p. 56.]]
-El valor de ''t''<sub>0</sub> que se usa en la ecuación depende de cómo se determine. Según la IUPAC, el tiempo muerto medido incluye los volúmenes aportados por el inyector, el detector y las conexiones, además del volumen de la columna.<ref name="IUPAC1993_p841" /> Agilent indica que, en fase reversa, el uracilo se emplea con frecuencia para medirlo, y que el tiempo muerto de la columna es el cociente entre el volumen muerto y el flujo.<ref name="Agilent2016_p146">Agilent Technologies. ''The LC Handbook: Guide to LC Columns and Method Development''. Publicación 5990-7595EN, 2016, p. 146.</ref> El mismo documento describe una estimación a partir de la primera perturbación de la línea base en el cromatograma.<ref name="Agilent2016_p58">Agilent Technologies. ''The LC Handbook: Guide to LC Columns and Method Development''. Publicación 5990-7595EN, 2016, p. 58.</ref>
-La revisión de Rimmer, Simmons y Dorsey señala que la medición del volumen muerto en cromatografía de líquidos de fase reversa no ha alcanzado un acuerdo unánime y que no existe un límite definido entre la fase móvil y la fase estacionaria, porque la fase enlazada se solvata con la fase móvil.<ref name="Rimmer2002_p219_220">Rimmer, C. A.; Simmons, C. R.; Dorsey, J. G. The measurement and meaning of void volumes in reversed-phase liquid chromatography. ''J. Chromatogr. A'' 2002, 965, 219–232, pp. 219–220.</ref> Los autores indican que muchas moléculas orgánicas pequeñas presentan tiempos de elución que aumentan al disminuir la fuerza de la fase móvil, lo que evidencia cierta retención y produce un volumen mayor que el volumen muerto «verdadero».<ref name="Rimmer2002_p224">Rimmer, C. A.; Simmons, C. R.; Dorsey, J. G. The measurement and meaning of void volumes in reversed-phase liquid chromatography. ''J. Chromatogr. A'' 2002, 965, 219–232, p. 224.</ref> Como el factor de retención se calcula con ''t''<sub>0</sub>, la elección del marcador modifica el valor de ''k'' y, por ello, la relación entre ''t''<sub>R</sub> y ''t''<sub>0</sub>.<ref name="Rimmer2002_p219_220" />
+En los métodos con gradiente, el [[volumen de retardo]] no afecta la retención en los isocráticos, pero sí la modifica de forma importante en los de gradiente; si un método con gradiente se traslada de un instrumento a otro y los tiempos de retención cambian, conviene comparar los volúmenes de retardo de ambos sistemas.<ref name="Agilent2016_p58">Agilent Technologies. ''The LC Handbook: Guide to LC Columns and Method Development''. Publicación 5990-7595EN, 2016, p. 58.</ref>
-== Consecuencias prácticas en el laboratorio ==
+== Para qué se usa ==
-* '''Dependencia del flujo.''' Dos corridas del mismo método con flujos distintos producen tiempos de retención distintos. El [[volumen de retención]], que es el volumen de fase móvil que sale entre la inyección y el máximo del pico, se obtiene como el producto del tiempo de retención por el flujo volumétrico y no varía con el flujo, por lo que resulta más adecuado cuando se requiere un valor de retención independiente del flujo que entrega la bomba.<ref name="Snyder1979_p25">Snyder, L. R.; Kirkland, J. J. ''Introduction to Modern Liquid Chromatography''. 2.ª ed. Nueva York: Wiley-Interscience, 1979, cap. 2, p. 25.</ref><ref name="Harvey2000_p548" /><ref name="USP621_p12" />
+=== Identificación tentativa ===
-* '''Anchura del pico en elución isocrática.''' En elución isocrática, la anchura de los picos aumenta con el tiempo de retención, de modo que los componentes que eluyen tarde producen picos más anchos.<ref name="Agilent2016_p56">Agilent Technologies. ''The LC Handbook: Guide to LC Columns and Method Development''. Publicación 5990-7595EN, 2016, p. 56.</ref> Véase [[Elución isocrática y en gradiente]].
+La coincidencia del tiempo de retención de una señal desconocida con el de un compuesto conocido, en el mismo sistema, es un indicio de que se trata del mismo compuesto, pero no lo demuestra: puede ocurrir que ningún compuesto conocido coincida o que más de uno presente un tiempo de retención similar. La identificación positiva requiere aislar la señal y caracterizarla con otras técnicas.<ref name="Snyder1979_p43_44">Snyder, L. R.; Kirkland, J. J. ''Introduction to Modern Liquid Chromatography''. 2.ª ed. Nueva York: Wiley-Interscience, 1979, cap. 2, pp. 43–44.</ref> Véase [[Análisis cualitativo y cuantitativo en HPLC]].
-* '''Volumen de retardo en gradiente.''' Agilent indica que el volumen de retardo no afecta la retención en métodos isocráticos, pero sí la modifica de forma importante en métodos con gradiente; si un método con gradiente se traslada de un instrumento a otro y los tiempos de retención cambian, conviene comparar los volúmenes de retardo de ambos sistemas.<ref name="Agilent2016_p58" /> Véase [[Volumen de retardo]].
-* '''Identificación tentativa.''' La coincidencia del tiempo de retención de una señal desconocida con el de un compuesto conocido, en el mismo sistema, es un indicio de que se trata del mismo compuesto, pero no lo demuestra: puede ocurrir que ningún compuesto conocido coincida o que más de uno presente un tiempo de retención similar. La identificación positiva requiere aislar la señal y caracterizarla con otras técnicas.<ref name="Snyder1979_p43_44">Snyder, L. R.; Kirkland, J. J. ''Introduction to Modern Liquid Chromatography''. 2.ª ed. Nueva York: Wiley-Interscience, 1979, cap. 2, pp. 43–44.</ref> Véase [[Análisis cualitativo en HPLC]].
+[[Archivo:WiQui_HPLC_tiempo_de_retencion_identificacion.png|thumb|center|600px|Identificación tentativa por tiempo de retención. Una señal de la muestra que coincide con el patrón (azul) es un indicio de identidad, pero un compuesto distinto (naranja) puede presentar el mismo tiempo de retención en el mismo sistema (esquema cualitativo). Figura elaborada por el autor, a partir de Snyder y Kirkland (1979), pp. 43–44.]]
-* '''Picos que se traslapan.''' Cuando dos picos están poco resueltos, el máximo aparente de cada uno se desplaza hacia el pico vecino y el tiempo de retención medido contiene un error.<ref name="Snyder1979_p43_44" /> Véase [[Resolución cromatográfica]].
-* '''Sobrecarga de la columna.''' Si la cantidad inyectada supera la capacidad lineal de la columna, los factores de retención dejan de ser constantes y los tiempos de retención ya no sirven para el análisis cualitativo por comparación con patrones.<ref name="Snyder1979_p27">Snyder, L. R.; Kirkland, J. J. ''Introduction to Modern Liquid Chromatography''. 2.ª ed. Nueva York: Wiley-Interscience, 1979, cap. 2, p. 27.</ref> Véase [[Capacidad lineal de la columna]].
+=== Picos traslapados ===
-* '''Uso en la aptitud del sistema.''' Los tiempos de retención y las retenciones relativas que aparecen en las monografías de la USP se indican con fines informativos, salvo que la monografía establezca otra cosa, y a las retenciones relativas no se les aplican criterios de aceptación.<ref name="USP621_p16">United States Pharmacopeial Convention. 〈621〉 ''Chromatography''. Texto armonizado (etapa 4), oficial desde el 1 de diciembre de 2022. USP–NF, sección sobre aptitud del sistema, p. 16 del PDF de armonización.</ref> Rimmer et al. señalan que, en la industria farmacéutica, el factor de retención se emplea como indicador de aptitud del sistema porque cambia cuando la columna envejece y pierde fase enlazada.<ref name="Rimmer2002_p219_220" /> Véase [[Aptitud del sistema]].
+Cuando dos picos están poco resueltos, el máximo aparente de cada uno se desplaza hacia el pico vecino y el tiempo de retención medido contiene un error.<ref name="Snyder1979_p43_44" /> Véase [[Resolución cromatográfica]].
+[[Archivo:WiQui_HPLC_tiempo_de_retencion_traslape.png|thumb|center|600px|Dos picos traslapados. El máximo de la señal registrada (negro) no coincide con el máximo real de ninguno de los dos componentes y queda desplazado hacia el pico vecino (esquema calculado con dos picos gaussianos). Figura elaborada por el autor, a partir de Snyder y Kirkland (1979), pp. 43–44.]]
+=== Sobrecarga de la columna ===
+Si la cantidad inyectada supera la capacidad lineal de la columna, los factores de retención dejan de ser constantes y los tiempos de retención ya no sirven para el análisis cualitativo por comparación con patrones.<ref name="Snyder1979_p27">Snyder, L. R.; Kirkland, J. J. ''Introduction to Modern Liquid Chromatography''. 2.ª ed. Nueva York: Wiley-Interscience, 1979, cap. 2, p. 27.</ref>
+=== Aptitud del sistema ===
+Los tiempos de retención y las retenciones relativas que aparecen en las monografías de la USP se indican con fines informativos, salvo que la monografía establezca otra cosa, y a las retenciones relativas no se les aplican criterios de aceptación.<ref name="USP621_p16">United States Pharmacopeial Convention. 〈621〉 ''Chromatography''. Texto armonizado (etapa 4), oficial desde el 1 de diciembre de 2022. USP–NF, sección sobre aptitud del sistema, p. 16 del PDF de armonización.</ref> En la industria farmacéutica, el factor de retención se emplea como indicador de aptitud del sistema porque cambia cuando la columna envejece y pierde fase enlazada.<ref name="Rimmer2002_p219_220" /> Véase [[Aptitud del sistema]].
 == Cuestionario de autoevaluación ==
-<!-- Las respuestas están ocultas y se muestran al hacer clic en "Ver respuesta" (clase mw-collapsible de MediaWiki). Si la wiki no tiene activado ese módulo, las respuestas quedan visibles debajo de cada pregunta. -->
+<!-- Las respuestas están ocultas y se muestran al hacer clic en "Ver respuesta" (clase mw-collapsible de MediaWiki). -->
-'''1. ¿Desde qué instante y hasta qué punto del pico se mide el tiempo de retención?'''
+'''1. ¿Desde qué instante y hasta qué punto del pico se mide el tiempo de retención, y qué es el tiempo de retención ajustado?'''
 <div class="mw-collapsible mw-collapsed" data-expandtext="Ver respuesta" data-collapsetext="Ocultar respuesta">
-Se mide desde el instante de la inyección de la muestra hasta el máximo del pico del componente en el cromatograma.
+Se mide desde el instante de la inyección hasta el máximo del pico del componente en el cromatograma. El tiempo de retención ajustado es la diferencia entre el tiempo de retención y el tiempo muerto, y corresponde al tiempo que el compuesto permanece en la fase estacionaria.
 </div>
-'''2. Un compuesto tiene un tiempo muerto de 1.5 min y un factor de retención ''k'' = 2.0. ¿Cuál es su tiempo de retención?'''
+'''2. Un compuesto sale a los 7.0 min y el tiempo muerto del sistema es de 2.0 min. ¿Cuál es su factor de retención?'''
 <div class="mw-collapsible mw-collapsed" data-expandtext="Ver respuesta" data-collapsetext="Ocultar respuesta">
-Se aplica ''t''<sub>R</sub> = ''t''<sub>0</sub> (1 + ''k''), de modo que ''t''<sub>R</sub> = 1.5 min × (1 + 2.0) = 4.5 min. Si el compuesto no se retuviera (''k'' = 0), su tiempo de retención sería igual al tiempo muerto.
+Se aplica la definición del factor de retención:
+:<math>k = \frac{t_R - t_0}{t_0}</math>
+:<math>k = \frac{7.0 \ \mathrm{min} - 2.0 \ \mathrm{min}}{2.0 \ \mathrm{min}}</math>
+:<math>k = \frac{5.0 \ \mathrm{min}}{2.0 \ \mathrm{min}}</math>
+:<math>k = 2.5</math>
 </div>
-'''3. Un analista observa que una señal desconocida y un patrón tienen el mismo tiempo de retención en el mismo sistema. ¿Qué puede concluir y qué no puede afirmar?'''
+'''3. Un compuesto tiene un tiempo de retención de 6.0 min con un flujo de 0.8 mL/min. Si el flujo se duplica a 1.6 mL/min, ¿cuáles son su nuevo tiempo de retención y su volumen de retención?'''
 <div class="mw-collapsible mw-collapsed" data-expandtext="Ver respuesta" data-collapsetext="Ocultar respuesta">
-Puede concluir que la coincidencia es un indicio de que se trata del mismo compuesto, es decir, una identificación tentativa. No puede afirmarlo de forma definitiva, porque más de un compuesto puede tener un tiempo de retención similar; la identificación positiva requiere aislar la señal y caracterizarla con otras técnicas.
+Con el flujo duplicado, el tiempo de retención se reduce a la mitad:
+:<math>t_{R,2} = \frac{6.0 \ \mathrm{min}}{2} = 3.0 \ \mathrm{min}</math>
+El volumen de retención es el producto del flujo por el tiempo de retención y no cambia:
+:<math>V_R = 0.8 \ \mathrm{mL/min} \times 6.0 \ \mathrm{min} = 4.8 \ \mathrm{mL}</math>
+:<math>V_{R,2} = 1.6 \ \mathrm{mL/min} \times 3.0 \ \mathrm{min} = 4.8 \ \mathrm{mL}</math>
 </div>
 == Véase también ==
-* [[Coeficiente de distribución]]
 * [[Factor de separación]]
 * [[Platos teóricos]]
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 == Ficha de documentación ==
-* '''Fecha:''' 9 de octubre de 2026.
+* '''Fecha:''' 12 de octubre de 2026.
 * '''Autor:''' Daniel Morales Gutiérrez.
 * '''Elaboración:''' Daniel Morales Gutiérrez, con asistencia de Claude Pro Investigación (Anthropic). Véase [[Metodología de elaboración de la WiQui HPLC]].

Diferencia entre revisiones de «Tiempo de retención»

Revisión del 13:36 12 oct 2026

Idea general

Tiempo muerto y tiempo ajustado

Cómo se mide

Expresión matemática

Ejemplo

Efecto del flujo

Retención y anchura de los picos

Para qué se usa

Identificación tentativa

Picos traslapados

Sobrecarga de la columna

Aptitud del sistema

Cuestionario de autoevaluación

Véase también

Ficha de documentación

Referencias

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